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食用菌母種的分離和培養技術
作者:    來源:本站整理    點擊數:   更新時間:2009年02月11日 【字體:

  母種培養基的配制

  1. 母種培養基的種類

  母種是菌種生產的關鍵,要求純度高,不能混生雜菌,同時母種的菌絲體較為纖細,分解培養料的能力較弱。因此,母種菌絲體需要培養在營養豐富,易被吸收,表面光滑易于鑒別有無雜菌感染的瓊脂培養基上。適合母種菌絲生長的瓊脂培養基種類很多,常用的有下列幾種:

  ① 馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂培養基: 馬鈴薯(去皮) 200克 瓊脂 20克 葡萄糖(或蔗糖) 20克 水 1000毫升
  ② 麥芽汁—葡萄糖—瓊脂培養基: 干麥芽 250克 瓊脂 15~20克 葡萄糖(或蔗糖) 10克 水 1000毫升
  ③ 胡蘿卜—葡萄糖—瓊脂培養基: 胡蘿卜 100克 瓊脂 20克 葡萄糖(或蔗糖) 20克 水 1000毫升
  ④ 蘑菇汁—葡萄糖一瓊脂培養基(適用于蘑菇): 鮮蘑菇 250克 瓊脂 20克 葡萄糖(或蔗糖) 20克 水 1000毫升
  ⑤ 蛋白胨—葡萄糖—瓊脂培養基: 蛋白胨 2克 葡萄糖 20克 磷酸氫二鉀 2克 維生素B1(硫胺素) 0.5毫克 磷酸二氫鉀 0.5克 瓊脂 18克 硫酸鎂 0.5克 水 l000毫升

  2. 母種培養基的制法

  以最常用的馬鈴薯—葡萄糖—瓊脂培養基的制法為例介紹如下:先將馬鈴薯去皮,洗滌,切成小塊加水1000毫升,煮沸15~20分鐘,取雙層紗布過濾,取其濾液,加入瓊脂和葡萄糖(或蔗糖),用文火加熱使其溶化,最后補足水分,使其容量仍為1000毫升。趁熱分裝于試管中,裝量約為試管長度的1/5左右,裝管時要注意不使培養基沾污試管壁和試管口。試管口塞上大小合適的棉花塞,塞入試管口內的長度為棉塞總長的3/5。塞好棉塞后,每10支作一捆,用牛皮紙包扎好后,置鐵絲網籠中,然后進行高壓滅菌。如作為孢子分離用,則將培養基分裝于三角瓶或培養皿中,然后高壓滅菌。

  3. 母種培養基的消毒滅菌

  母種培養基通常用高壓蒸汽滅菌鍋來消毒滅菌,常用的高壓蒸汽滅菌鍋有直式、臥式和手提式三種。將配制好后的母種培養基移入上述任何一種高壓蒸汽滅菌鍋中,在15公斤/平方厘米 壓力下,消毒滅菌30分鐘。
高壓蒸汽滅菌主要是依靠提高蒸汽的溫度來滅菌的,因此滅菌時,應將鍋內的冷空氣全部排除。否則,盡管壓力表上的壓力已達到要求,然而,滅菌鍋內的溫度卻未達到所需的溫度(表11)。排除冷空氣的方法是加熱后當壓力表上指針上升到0.5公斤/平方厘米時,打開排氣閥,放氣至指針仍回到“零”的位置。滅菌的時間是以排除冷空氣后,壓力回升到1.5公斤/平方厘米 時才開始計算。每次滅菌之后,要等壓力降到“零”時,才打開鍋蓋,否則,滅菌的液體會因突然減壓而外溢,玻璃器皿也會因突然降溫而破裂。
  
下表高壓滅菌時壓力的換算及其與溫度的關系 :
磅/平方英寸     公斤/平方厘米        滅菌器中的溫度(℃)
                                   排除空氣    未排除空氣
    5            0.352              108.4        72
   10            0.703              115.2        90
   15            1.055              121.0       100
   20            1.406              126.0       109
   25            1.758              130.4       115
   30            2.109              134.5       121
  在沒有高壓蒸汽滅菌鍋設備的情況下,可用蒸鍋、蒸籠等進行常壓滅菌。由于密封性差,壓力升不高,溫度只能升至102℃左右因此要連續蒸4~6小時才能達到滅菌的目的。
 
  高壓嚴菌后將試管取出排成斜面備用。

  母種分離材料的選擇

  1. 子實體的選擇

  無論是用作孢子分離或組織分離的子實體,都要從產量高,長勢好,適應性強,無雜菌蟲害的群體中,選擇朵大,生長健壯的單生子實體作為分離的材料。
 
  選作分離的子實體,成熟度要適當,如蘑菇、草菇具有菌膜,最好選菌膜將破而未破的成熟度,這種子實體發育已成熟,子實層又未受污染,因此能很快散出大量的無菌孢子。對沒有菌膜或菌膜自幼已破的食用菌,如香菇、平菇等,則以選取八分熟,正在釋放孢子的個體為最好;因為剛從擔子彈射出來的孢子基本上也是無菌的。

  2. 菇木和耳本的選擇

  木生食用菌如香菇、銀耳、黑木耳等,可以從它們生長的基質,即菇木和耳木作為分離的材料。選擇時,應從野生或人工栽培場所挑選子實體生長健壯,朵大,長勢好,菌絲在段木中發育旺盛,材質較為結實,尚未腐爛,一般是接種后一年內已出菇、出耳而無雜菌害蟲感染的幼齡菇木或耳木為最好。采去子實體后,截取適當部位,掛于通風處風干后,供分離時用。

  母種的分離方法

  1. 孢子分離法

  是利用食用菌的有性孢子或無性孢子,萌發成菌絲,獲得細菌種的一種方法。按分離時挑取孢子的數目不同,又分為單孢子分離法和多孢子分離法兩種。蘑菇、草菇等由于孢子沒有性的區別,采用單孢子分離獲得純菌種,有結實能力,而其它食用菌如香菇、銀耳、黑木耳等由于孢子有性別之分,單孢子分離得到的菌絲不能結實,所以,只在育種上采用,生產上很少采用多孢子分離法,是把許多孢子接種于同一培養基上,讓它們萌發,自然交配而獲得純種,操作簡單易學,生產上經常采用。由于采集孢子的方法不同又分為如下幾種:

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本文共 2 頁,第  [1]  [2]  頁

  常用計量單位符號 1、時間:d(天)、h(小時)、min(分)、s(秒)。 2、長度:km(千米)、m(米)、cm(厘米)、mm(毫米)。 3、面積:m2(平方米)、667m2(畝)、hm2(公頃)。 4、體積:m3(立方米)、L(升)、ml(毫升)、μl(微升)。 5、質量:t(噸)、kg(公斤 千克)、g(克)、mg(毫克)、μg(微克)。 6、濃度:mg/L、mg/kg(ppm,1×10-6)。

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Tags:食用菌 菌種制作技術

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